Изучение двух видов подснежника с программой Altami Studio
Введение. Подснежник Воронова и подснежник Белоснежный используются в традиционной медицине и гомеопатии для лечения заболеваний нервной системы. Систематические данные по стандартизации отечественного гомеопатического сырья подснежников отсутствуют.
Цель исследования — изучение свежего ГомЛРС 2 видов подснежника, включающее определение морфолого-анатомических диагностических признаков для идентификации ГомЛРС.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектами исследования служили свежие цветущие растения (все части — Planta tota) подснежника Воронова и подснежника белоснежного (ГомЛРС), заготовленнные в Ботаническом саду Первого МГМУ им. И.М. Сеченова в апреле 2016 года.
Макроскопическое и микроскопическое исследование проводилось согласно требованиям ОФС ГФ РФ XIII: “Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы”, “Травы”, “Цветки”, “Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов” [10]. Для микроскопического анализа использовался микроскоп “Альтами Био 2” (окуляр 10 ×, объективы 4×, 10×, 40×, 100×). Фотографии получали с помощью цифровой окулярной камеры UCMOS05100KPA и обрабатывали по программе Altami Studio.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Свежее цельное сырье подснежников Воронова и белоснежного включает растения целиком (planta tota), — надземную (листья, цветоносы и цветки) и подземную (луковица и корни) части (рис. 1).
При микроскопическом исследовании подснежников установлено, что листовая пластинка у обоих видов дорзовентрального типа (рис. 2), но у подснежника Воронова в основании имеет треугольную форму с длинными краями, которые загибаются во внутрь, ширина листа 3,6 — 4,2 мм, количество проводящих пучков — 28 — 31. У подснежника белоснежного листовая пластинка в основании имеет форму вогнутого треугольника с короткими краями, ширина листа — 2,4 — 3,1 мм, количество проводящих пучков — 12 — 20.
У обоих видов подснежника клетки эпидермиса, вытянутые по длине листа, прямоугольной формы с прямыми стенками (рис. 3). Стенки клеток эпидермиса имеют четко видные утолщения. Устьица округлые, окружены 4 (реже — 5) эпидермальными клетками (тетра — и пендацитного типа). Кутикула гладкая, местами — продольно морщинистая. Мезофилл листа нечетко дифференцирован на палисадную и губчатую ткани, состоит из округлых клеток. Несколько рядов клеток мезофилла, прилегающих к верхнему жпидермису, имеют незначительно удлиненные в радиальном направлении клетки. В центральной части мезофилл обладает рыхлой структурой, образуя круглые воздухоносные полости, которые расположены между проводящими пучками. В периферической части мезофилла видны клетки с пучками рафид оксалата кальция (рис. 4). Проводящие пучки боковых и центральной жидок коллатерального типа. Сосудисто-волокнистый пучок включает сетчатые и лестничные сосуды и спиральные трахеиды.
Изучение атомического строения цветка показало, что эпидермис венчика с обеих сторон состоит из многоугольных прямостенных клеток, почти изодиаметрических с ссочковидными выростами и продольно-морщинистой кутикулой. Устьица отсутствуют. На нижнем эпидермисе сосочковидные выросты развиты сильнее. Пыльцевые зерна овальной формы, однобороздные, гетерополярные, с гладкой поверхностью. Строение прицветника аналогично строению листа. Клетки эпидермиса цветоноса — прямоугольные, стенки — прямые, кутикула — ровнаяю Устьица — тетрацитного типа, размер — аналогичен устьичным комплексам листа. В периферической части мезофилла цветоноса имеются клетки с пучками рафид оксалата кальция.
Изучение атомического строения цветка показало, что эпидермис венчика с обеих сторон состоит из многоугольных прямостенных клеток, почти изодиаметрических с сосочковидными выростами и продольно-морщинистой структурой. Устьица отсутствуют. На нижнем эпидермисе сосочковидные выросты развиты сильнее. Пыльцевые зерна овальной формы, однобороздные, гетерополярные с гладкой поверхностью. Строение прицветника аналогично строению листа. Клетки эпидермиса цветоноса — прямоугольные, стенки — прямые, кутикула — ровная. Устьица — тетрацидного типа, размер— аналогичен устьичным комплексам листа. В периферическрй части мезофилла цветоноса имеются клетки с пучками рафид оксалата кальция.
Наружные чешуи луковиц подснежников представляют собой омертвевшие оболочки с полностью деформированными клетками паренхимы. Внешний и внутренний эпидермисы наружной чешуи состоят из клеток прозенхимного типа с закругленными углами и четковидными утолщениями (рис. 5). Запасающие чешуи по строению подобны листу. Основная паренхима их состоит из тонкостенных округлой форсы клеток, заполненных крахмальными зернами округло-яйцевидной формы. Крупные крахмальные зерна имеют 2—3, реже 4-лучевую трещину (рис. 6). В наружной части паренхимы чешуй встречаются клетки с рафидами, расположенные параллельно продольной оси луковицы в виде пучков. Проводящие пучки закрытого коллатерального типа с паренхимной обкладкой расположены ближе к внутренней стороне чешуй.
У подснежников — корень первичного строения, клетки эпидермиса — крупные, с утолщенной внешней стенкой, овальной формы, удлиненные в радиальном направлении. Волоски представляют собой эпидермальные выросты. Клетки коровой паренхимы — тонкостенные, округлой формы с многочисленными межклетниками различного размера и формы. Внутренняя часть коры имеет клетки овально-многоугольной формы, которые удлинены в радиальном направлении. Центральный осевой цилиндр (ЦОЦ) малого диаметра. Древесинная часть корня состоит, как правило, из 1 крупного и 3 (подснежник Воронова) лучей сосудов малого диаметра. Флоэма представлена также 3 или 4 лучами. Эндодерма выражена нечетко.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, даны подробные характеристики внешних признаков и анатомического строения 2 видов подснежников: Воронова и белоснежного. Выявоенный копмлекс признаков позволяет достоверно проводить видовую идентификацию гомеопатического лекарственного растительного сырья. Установлено, что существуют различия в линейных размерах на макро-, так и на микроуровне. Размеры органов подснежников Воронова значительно больше таковых у подснежника белоснежного, что прослеживается и в линейных размерах клеточных структур. Полученные данные использованы при составлении проектов фармакопейных статей на гомеопатическое лекарственное растиительное сырье 2 видов подснежника.
ЛИТЕРАТУРА
1. Willis J.C, Amaryllidaceae. A Dictionary of the flowering plants & ferns. 8th edn. Cambridge University Press. Cambridge. 1988.
2. World Checklist of selected Plant Families (WCSP) (Internet). Royal Botanic Gardens. Kew (cited 2016 October 2). Available from: http://apps.kew.org/wcsp/home.do
3. Boericke W. Homeophatic material medica, 2004.
4. Bokov D.O., Samylina I.A. Homeophatic remedies if snowdrops: key aspects for standartization procedures. Proceedings of the V International scientific-practical conference “Fundamental science and technology — promising developments” (24-25 February 2015). North Charleston, USA. Vol.2 Pharmaceutical sciences: 184-6.
5. Davis A.P., Barnett J.R. The leaf anatomy of the genius Galanthus L. (Amaryllidaceae J. St.Hil.). Botanical Journal of the Linnean Society, 1997$ 123 (4): 333-52.
6. Sahin N.F. Morphological anatomical and physiological studies on Galanthus ikarlae Baker and G. rizehensis Stern (Amaryllidaceae) grown around NE Turkey. Pakist. J. Bot., 1998;30: 117-31.
7. Chudzik B.et al. Biology of flowering of Galanthus nivallis L (Amaryllidaceae). Annales Universitatis Mariae Curie-Skodowska. Sectio EEE Hprticultura (Poland); 2002.
8. Budnikov G. Morphological variation of specimens and populations of Galanthus nivallis L. in western rehions of Ukraine. Thaisizia — J.Bot., Kosice, 2011; 21: 95-109.
9. Oybak Dönmez E.IşIK S.Pollen morphology of Turkish Amaryllidaceae, Ixioliriaceae and Iridaceae. Grana, 2008: 47(1): 15-38.
10. State Pharmacopoeia of the Russian Federation, 12th edition, Vol. 2- (cited 2016 October 4). Available from: http://193.232.107/fern/